上海富衡|喜欢聚会的悬浮细胞——NK92/NK92MI

小衡衡 2024-05-10 09:41:09

悬浮细胞的生长形态一般分为单个生长和聚团生长,今天来分享两个聚团生长的细胞中,比较难养,需要注意培养技巧的细胞,分别是NK92和NK92MI

1、培养条件:

NK-92 75%MEMα+0.2mM Inositol+0.1mM β-mercaptoethanol+0.02mM Folic Acid+12.5% HS+12.5% FBS+0.1mM β-Mer+200U/ml IL-2

NK-92MI 75%MEMα+0.2mM Inositol+0.1mM β-mercaptoethanol+0.02mM Folic Acid+12.5% HS+12.5% FBS+0.1mM β-Mer

2、来源:

NK-92细胞是从外周血单核细胞通过微粒体基因转化法衍生来的一株IL-2依赖型NK细胞株。

NK-92MI细胞是转染得到的源自NK-92细胞的IL-2非依赖的NK细胞株。

所以两者的形态及生长特性大致相同

3、生长形态:

NK-92与NK-92MI细胞都为悬浮聚团生长,少部分细胞分散,细胞间隙会存在一些死细胞和细胞碎片,不影响细胞生长。

4、到货处理:

此细胞喜成团生长,单个细胞过多会导致细胞凋亡,为了减少离心及吹打次数,我库都以15ml离心管发货。

收到货后直接将离心管中的细胞及培液轻轻吸出,放入两个T25培养瓶中静置一个晚上,第二天过来查看细胞的成团情况。

如何传代?

l 将培养瓶竖着静置10分钟左右,当明显看到细胞团沉淀到细胞瓶底部后,轻轻吸出3ml左右培养基弃掉

l 将新鲜的完全培养基放入新的培养器皿中

l 用巴氏吸管轻轻地将底部细胞团吸出,放入已经加好新鲜培养基的器皿中,轻轻晃动混匀

l 当细胞团生长很快,密度超过80%时,要及时进行传代

cell culture

5、注意事项:

1、在后期培养过程中,尽量采用半换液的方法来处理

2、如果细胞团较少,可竖着在培养箱中培养

3、此细胞喜欢聚团生长,尽量不要将细胞团吹成单个细胞

4、传代2-3次后,可离心一次,以去除一部分死细胞

0 阅读:4

小衡衡

简介:一个从事生物科技,专注于细胞相关技术、服务的打工仔